Родился 15 июня 1970 года в селе Лужки Железногорского района Курской области в семье рабочих; русский.
С 1982 года нёс послушания в храмах Курской и Орловской епархий. По окончании средней школы был призван в ряды Советской армии. После армии поступил в Московскую духовную семинарию[1].
29 мая 1994 года в Покровском академическом храме Троице-Сергиевой лавры епископом Дмитровским Филаретом рукоположён в сан иеродиакона[1].
В сентябре 1994 года назначен регентом вновь образованного академического хора студентов семинарии и академии[1].
8 октября 1994 года, в день памяти преподобного Сергия Радонежского, в Покровском академическом храме Троице-Сергиевой лавры епископом Пинским и Лунинецким Стефаном (Корзуном) рукоположён в сан иеромонаха[1].
В июне 1995 года окончил семинарию и в августе того же года был зачислен на 1-й курс академии. В июне 1999 года окончил академию со степенью кандидата богословия, защитив диссертацию по кафедре патрологии на тему «Сотериология святого Иоанна Златоуста». После окончания Московской духовной академии оставлен в духовных школах преподавателем и регентом академического хора[1].
В августе 2000 года распоряжением Патриарха Московского и всея Руси Алексия II назначен проректором пастырских курсов, преобразованных впоследствии в Сретенскую духовную семинарию, при Сретенском монастыре в Москве и определён в братство обители. Пребывая в Сретенском монастыре, исполнял послушание благочинного монастыря и регента праздничного монастырского хора[1]. По воспоминаниям архимандрита Тихона (Шевкунова), «Его деятельность стала для нас большим подспорьем, потому что из насельников Сретенского монастыря никто „очно“ в духовной школе не учился. У многих было светское высшее образование, а вот специфику внутреннего устройства семинарии мы знали недостаточно. Отец Амвросий много потрудился, привнес в наше совсем юное тогда учебное заведение все самое лучшее, что накопил за годы жизни в духовных школах»[2].
3 июня 2004 года, архиепископом Орехово-Зуевским Алексием (Фроловым), по благословению Патриарха Московского и всея Руси Алексия II в соборном храме Сретенского монастыря возведён в сан игумена.
28 декабря 2004 года, в день памяти священномученика Илариона, архиепископа Верейского, в соборном храме Сретенского монастыря патриархом Московским и всея Руси Алексием II возведён в сан архимандрита[4].
Решением Священного синода от 19 июля 2006 года назначен викарием Московской епархии, епископом Бронницким[7]; на том же заседании Синода почислен на покой правящий архиерей Кемеровский епархии Софроний (Будько)[8].
Решением Священного синода от 6 октября 2008 года назначен епископом Гатчинским, викарием Санкт-Петербургской епархии, ректором Санкт-Петербургских духовных школ. 25 октября вступил в должность ректора Санкт-Петербургских духовных школ[9].
Решением Священного синода от 12 марта 2013 года определено иметь титул «Петергофский»[10].
1 февраля 2014 года, в день пятилетия со дня интронизации патриарха Московского и всея Руси Кирилла, за литургией в храме Христа Спасителя патриархом возведён в сан архиепископа[11].
Как писала газета «Фонтанка», запомнился петербургской пастве своим исключительно миролюбивым слогом. В разгар конфликта между музейщиками и православными вокруг Исаакиевского собора, смог сбавить накал, извинившись за «тех, кто был не сдержан в словах и эмоциях», а также призвал не воздвигать стен «между собой и другими»[12].
6 октября 2017 года решением Священного синода (журнал № 86) была сформирована рабочая группа по сотрудничеству Русской православной церкви с Евангелическо-лютеранской церковью Финляндии, сопредседателем которой со стороны Русской православной церкви был определён архиепископ Петергофский Амвросий как ректор Санкт-Петербургской духовной академии[13].
14 июля 2018 года решением Священного синода освобождён от должности ректора Санкт-Петербургских духовных школ и назначен ректором Московской духовных академии и семинарии, определён быть викарием патриарха Московского и всея Руси[14].
7 ноября 2018 года по прибытии в Киев для участия в торжествах Киевской духовной академии был задержан на пропускном пункте аэропорта и выдворен с территории Украины[15]. Отдел внешних церковных связей Московского патриархата по межправославным отношениям назвал инцидент следствием гипертрофированной шпиономании и «плодом недавних антиканонических решений Константинополя»[16]. Государственная пограничная служба Украины пояснила, что она «выполнила поручение одного из украинских правоохранительных органов о том, что данное лицо не может быть допущено на территорию Украины»[17].
4 апреля 2019 года решением Священного синода в связи с изменением места служения освобождён от сопредседательства в рабочей группе по сотрудничеству Русской православной церкви с Евангелическо-лютеранской церковью Финляндии[18].
9 июля 2019 года решением Священного синода назначен временно исполняющим обязанности ректора Сретенской духовной семинарии. Возглавил созданную тогда же комиссию для «изучения возможности оптимизации образовательного процесса в указанных духовных школах и повышения уровня координации их научно-педагогической деятельности»[19]. По поводу принятого решения он написал: «На данном этапе духовное образование в МДА находится не на том уровне, на котором оно должно быть в главной академии Русской православной церкви». Одна из причин, по словам архиепископа Амвросия, «и немаловажная» — удалённость от столицы, эта причина «влечёт за собой массу других». В будущем Московская духовная академия призвана стать «современным богословским центром православного мира»[20].
25 августа 2020 года решением Священного синода назначен архиепископом Тверским и Кашинским, главой Тверской митрополии, с освобождением от должности наместника Сретенского ставропигиального монастыря и ректора Сретенской духовной семинарии[22].
28 августа 2020 года за Литургией в Храме Христа Спасителя в Москве Патриархом Кириллом возведён в сан митрополита[23].
↑Наречение м хиротония архимандрита Амвросия (Ермакова) во епископа Прокопьевского, викария Кемеровской епархии // Журнал Московской Патриархии. — 2005. — № 4. — С. 14—19
Учение об Иисусовой молитве по трудам святителя Феофана Затворника // Церковь и время. 2005. — № 1 (30). — С. 126—141.
Из поучений Святителя Иоанна Златоуста // Помоги, Господи, изжить гордыню / сост. свящ. Виктор Гусев. — М. : Сибирская благозвонница, 2007. — 208 с. — С. 73-75
Методы борьбы с помыслами и критерии их различения в русской аскетической традиции // Церковь и время. — 2009. — № 4 (49). — С. 106—128
«Ректор — ректору». Современный взгляд на личность архиепископа Михаила // Архиепископ Михаил (Мудьюгин) в воспоминаниях и размышлениях. Материалы конференции, посвященной 100-летию со дня рождения архиепископа Михаила (Мудьюгина) 1912—2000. / Под редакцией свящ. К. Костромина и Д. В. Волужкова — Санкт-Петербургская православная духовная академия, 2014. — С. 9-15
Святитель Иоанн Златоуст : Учение о спасении. — М.: Русскiй Хронографъ, 2003. — 223 с. — ISBN 5-87468-045-2.
Введение в аскетику: учебник. — Санкт-Петербург: СПбПДА, 2017. — 263 с. — ISBN 978-5-906627-40-7. (в соавторстве со священником Михаилом Легеевым)
Расширяя границы сердца. — СПб.: Издательство СПбПДА, 2018. — 192 с. — ISBN 978-5-906627-53-7.
Померање граница срца / са руског превео епископ моравички Антоније (Пантелић). — Православац, 2019. — 204 с. — ISBN 978-86-84429-32-4.
Таинство прекрасных дел. — М.: Сретенский ставропигиальный мужской монастырь, 2020. — 256 с. — ISBN 978-5-7533-1637-0.
Амвросий, митрополит Тверской и Кашинский. Вглядываясь в Лик Христа. Евангелие как приглашение к радости. — М.: Никея, 2021. — 304 с. — ISBN 978-5-907457-02-7.
Ответ священника. Слова любви, надежды и веры. — М.: Эксмо, 2021. — 320 с. — ISBN 978-5-04-118198-7.